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大腸桿菌(jun)顯(xian)色(se)培養基(ji)是青(qing)島海博生物公司改良的培養基(ji),用(yong)于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌(jun)的快速檢測。大腸桿菌(jun)顯(xian)藍綠色(se),大腸菌(jun)群(qun)顯(xian)無色(se),其它菌(jun)顯(xian)黃色(se)或無色(se),革蘭(lan)氏陽性菌(jun)被抑制。
成份(g/L)
特殊營養物質 | 37.9 |
顯色劑 | 0.2 |
瓊脂 | 12.0 |
pH 6.8±0.2 25℃ |
此配方可以進行改良或增(zeng)加營養(yang)成(cheng)份(fen)以獲得Z佳(jia)的結(jie)果。
用法
稱(cheng)取(qu)本品(pin) 50.1g 加(jia)入 1000ml 蒸餾水,加(jia)熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘(zhong)。分裝(zhuang)三(san)角瓶,121℃ 高壓(ya)滅(mie)菌 15 分鐘(zhong)。取(qu) 1ml 制(zhi)備(bei)好(hao)的(de)樣品(pin)液加(jia)入直徑為 9cm 無菌平皿(min)中(zhong)心,傾(qing)入冷卻(que)(que)至 45-50℃ 培(pei)(pei)養(yang)基約 15ml,混(hun)勻,凝固(gu)后,36℃ 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 18~24h 。或冷卻(que)(que)至 45-50℃ 時,傾(qing)入無菌平皿(min),瓊脂*凝固(gu)后,在 37℃ 的(de)培(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)倒置(zhi)放(fang)置(zhi) 1-2 小(xiao)時,加(jia)入適當稀釋(shi)度的(de)樣品(pin)液 1ml,涂布于培(pei)(pei)養(yang)基上,36℃ 培(pei)(pei)養(yang)18~24h。
操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養基中混勻或涂布于平板上;
3、36℃ 培養18~24h,選用有 30~200 個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。
總大腸桿菌=藍綠色菌落;
4、對(dui)可疑大(da)腸桿(gan)菌(jun)菌(jun)落(luo)可劃線接種到營養瓊脂平板上(shang),36℃ 培養 12-16 小時,挑取(qu)單菌(jun)落(luo)做大(da)腸桿(gan)菌(jun)全(quan)套生化試驗(本公司有生化鑒定管套裝(zhuang) 4種x4套)。
質量控制
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養 18~24h 小(xiao)時:
質(zhi)控菌(jun)株 | ATCC | 生(sheng)長(chang)情(qing)況 | 菌落(luo)顏色(se) |
單增李氏菌(jun) | 19114 | -/+ | 無色 |
金黃色葡(pu)萄球菌 | 25923 | -/+ | 無色 |
大腸桿菌 | 25922 | +++ | 藍色 |
沙(sha)門氏(shi)菌 | 14028 | +++ | 無色 |
產氣腸桿菌 | 23355 | +++ | 無色 |
方法的局限性
本培養基鑒定大腸桿菌,少數情況下可能會出現假陽性,但不會出現假陰性,有時可能需做其它補充試驗。
典型特征
大腸桿(gan)菌典型菌落為(wei)(wei)藍綠色,大腸菌群為(wei)(wei)無色菌落,其(qi)它(ta)細菌為(wei)(wei)無色或黃色菌落。
大腸桿(gan)菌顯色培養(yang)基 大腸桿(gan)菌ATCC25922 | 大腸桿(gan)菌(jun)顯色培養基 產氣腸桿(gan)菌(jun)ATCC35029 |
大腸桿菌顯色培養基 沙(sha)門氏(shi)菌ATCC14028 | 大腸(chang)(chang)桿菌顯色(se)培養基(ji) 陰溝腸(chang)(chang)桿菌ATCC23355 |
貯存
制(zhi)備好的平板應立即使用(yong),應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗(an)干燥處(chu), 保存溫度 2-8℃,注(zhu)意(yi)避光保存。
失效
干燥培養(yang)基超過保質期(qi)、結塊(kuai)和顏色變化都不能使用。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
大腸桿菌顯色培養基的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。
注:回收率計(ji)算(suan)時(shi),用TSA瓊(qiong)脂做對照培養基。
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