其中，濕熱滅(mie)菌(jun)法(fa)又包括四種方式：煮(zhu)沸法(fa)、流動蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)法(fa)、間歇(xie)滅(mie)菌(jun)法(fa)和壓(ya)(ya)力蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)法(fa)。通(tong)常(chang)來說，使用比(bi)較多的(de)是壓(ya)(ya)力蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)法(fa)。

　　但是對于有些培養基來說，高壓條(tiao)件會損壞(huai)培養基中(zhong)的(de)某些成分，不利于培養基的(de)使用，所以只能采用煮沸滅菌的(de)處理(li)方法。

　　接下來(lai)主要(yao)就煮(zhu)沸(fei)滅菌方法進(jin)行討論，話不多說一起看(kan)看(kan)吧。

　　一、煮沸滅菌(jun)的常見表述

　　有關煮沸滅菌的描述，通常有如下幾(ji)種方式：

　　a、稱取本品41.5g，加(jia)熱溶解于1000ml蒸餾水中，煮沸不(bu)要超過2分鐘(zhong)。無(wu)需高壓滅菌。臨用時(shi)制備(bei)，不(bu)得(de)超過3小時(shi)。(參(can)考(kao)VRBA培養基：點擊查(cha)看)

　　b、稱取本品50.3g，加入(ru)(ru)1000ml蒸餾水中，加熱煮沸(fei)至(zhi)*溶解，冷至(zhi)45-50℃，搖勻(yun)，傾入(ru)(ru)無(wu)菌(jun)平(ping)皿備用。無(wu)需(xu)高壓(ya)滅菌(jun)。(參考BS培(pei)養(yang)基：點(dian)擊查看)

　　c、稱(cheng)取(qu)本品89g，煮沸(fei)溶(rong)解于1000ml蒸餾水中，冷至45-50℃時，傾入無菌(jun)平皿，備用。注：無需高壓滅(mie)菌(jun)。(參(can)考(kao)TCBS培養基(ji)：點擊查看(kan))

　　d、稱取(qu)本品57g，加(jia)熱(re)攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，不要過分加(jia)熱(re)，冷至(zhi)50-55℃時(shi)，傾入無菌(jun)平(ping)皿(min),部(bu)分開(kai)蓋(gai)干(gan)燥(zao)2h，然后蓋(gai)上，備(bei)用。無需(xu)高壓滅菌(jun)。在 24小時(shi)內使用。(參考XLD培養基(ji)：點(dian)擊查看(kan))

　　這些方法描述中，都特別強調“無(wu)需高壓滅菌”、“不要(yao)過分加熱”、“煮沸充分溶(rong)解”，那么究竟該怎樣(yang)操(cao)作，才能達到既滅菌*又(you)盡量降(jiang)低(di)對培養基的破壞呢(ni)?

　　二、煮(zhu)沸滅菌的實際操作

　　1、關于(yu)煮(zhu)沸方(fang)式，有人(ren)提出可(ke)以隔(ge)(ge)水(shui)煮(zhu)沸，但經過反復試驗，發現這種煮(zhu)沸方(fang)式存在(zai)兩大弊端(duan)：①溫度不(bu)夠，達(da)不(bu)到滅菌效果;②經隔(ge)(ge)水(shui)煮(zhu)沸的含瓊脂培養基，在(zai)水(shui)浴(yu)的過程(cheng)中易(yi)出現分層現象。

　　2、為了對培養基進行有效煮沸滅(mie)菌，根據我(wo)們實踐摸索，建(jian)議如下操(cao)作：

　　①準(zhun)備好電磁爐和搪瓷(ci)缸(不要用(yong)鐵質容器);

　　②將培養基按比(bi)例加水(shui)，稱量(liang)至搪瓷缸中，用玻璃棒不(bu)斷攪拌，直至*溶解(jie)、無明顯團狀物(wu)或顆粒;

　　③將搪瓷(ci)缸置(zhi)于電磁爐上(shang)，大火燒開(kai)，期(qi)間持續攪拌，避免糊底(di);當液面*沸(fei)騰后(hou)，立(li)即將搪瓷(ci)缸從(cong)電磁爐上(shang)拿開(kai)，算(suan)是一(yi)次煮(zhu)沸(fei)操作;液面回落后(hou)，立(li)即放(fang)回電磁爐，重(zhong)復上(shang)面的步驟;總(zong)共煮(zhu)沸(fei)3次即可。

　　④將煮(zhu)好的培養基冷卻至需要的溫度，進行傾(qing)注平皿等(deng)操(cao)作。